摘要
目的观察华支睾吸虫感染大鼠肝脏组织微小RNA(miR)-122的表达变化及其与血清炎症细胞因子表达水平的相关性。方法选择24只SPF级Wistar雄性大鼠, 采用随机数字表法按体质量(100~120 g)分为对照组(100 μl生理盐水灌胃)、感染4周组(100个华支睾吸虫囊蚴灌胃)、感染8周组(100个华支睾吸虫囊蚴灌胃), 每组8只。感染第3周开始收集大鼠粪便, 采用生理盐水直接涂片进行华支睾吸虫感染Wistar大鼠动物模型鉴定;感染4、8周组大鼠分别于感染4、8周后处死, 对照组大鼠分别于感染4、8周后各处死4只, 采集各组大鼠心脏血及左叶肝脏组织。采用苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察肝脏病理损伤情况, 实时荧光定量PCR检测肝脏miR-122表达水平, Luminex 200液相悬浮芯片检测血清炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)]表达水平;利用Pearson相关分析miR-122与炎症细胞因子的相关性。结果光镜下, 对照组大鼠肝细胞形态正常, 未见炎症细胞浸润;感染4周组大鼠肝脏组织汇管区周围有淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润;感染8周组大鼠肝细胞排列紊乱、出现不同程度肿胀, 细胞质疏松浅染, 部分肝细胞呈水样变性, 肝脏组织内可见胆管扩张、胆管壁增厚。对照组和感染4、8周组大鼠肝脏miR-122(1.00 ± 0.32、2.57 ± 0.60、3.63 ± 1.63), 血清TNF-α[(0.14 ± 0.06)、(0.43 ± 0.09)、(0.61 ± 0.10)ng/ml]、IL-6表达水平[(0.03 ± 0.01)、(1.06 ± 0.24)、(1.48 ± 0.33)ng/ml]比较, 差异均有统计学意义(F = 13.36、69.99、82.23, 均P < 0.001);IL-1β表达水平比较差异无统计学意义(F = 2.15, P = 0.141)。Pearson相关分析结果显示, 肝脏miR-122与血清TNF-α和IL-6表达水平均呈正相关(r = 0.67、0.80, 均P < 0.001)。结论华支睾吸虫感染可引起宿主肝脏miR-122表达升高, 且miR-122与血清炎症细胞因子TNF-α、IL-6表达水平密切相关。
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单位哈尔滨医科大学附属第二医院; 哈尔滨医科大学; 基础医学院