黑曲霉ZF-34脂肪酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达

作者：苟万晓; 范延超; 吕昂; 胡元森^*

来源：河南工业大学学报(自然科学版), 2019, 40(05): 59-63.

DOI：10.16433/j.cnki.issn1673-2383.2019.05.010

• 黑曲霉
• 脂肪酶
• 基因克隆
• 毕赤酵母

为了使黑曲霉脂肪酶基因在毕赤酵母中表达并实现高密度发酵生产,采用PCR方法从黑曲霉基因组DNA中扩增出脂肪酶基因Lip A,测序结果表明Lip A基因编码区全长894 bp,编码297个氨基酸,与其他黑曲霉脂肪酶基因列序相似性高达99%。将Lip A基因连接到质粒p PIC9K上,构建了p PIC9K-LipA重组载体。将该重组载体转化到毕赤酵母GS115中,经甲醇诱导,该酶基因在酵母细胞中获得活性表达,并能将酶蛋白分泌到胞外。重组菌株GS115/p PIC9K-LipA经100 L发酵罐发酵144 h,菌体湿重高达100. 5 g/L,发酵液中酶活性达1 950 U/m L。

• 单位
  生物工程学院; 河南工业大学