摘要

目的探讨上调miR-19b表达对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响及机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,将其分为对照组、H2O2组、H2O2+miR-NC组和H2O2+miR-19b组,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组细胞中miR-19b表达,四甲基噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞存活率和凋亡率,相关试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)水平,蛋白印迹(Western blot)检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)等蛋白表达。结果与对照组相比,H2O2组细胞中miR-19b表达、细胞存活率和细胞内SOD、GSH-Px活力及PI3K、p-AKT蛋白表达水平均降低(P均<0.05),而细胞凋亡率、LDH活力和MDA含量均升高(P均<0.05)。与H2O2组相比较,H2O2+miR-19b组miR-19b表达、细胞存活率和细胞内SOD、GSH-Px活力以及PI3K、p-AKT蛋白表达水平均升高(P均<0.05),而细胞凋亡率、LDH活力和MDA含量均降低(P均<0.05)。结论上调miR-19b表达可提高H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞存活率,减轻细胞凋亡和氧化应激损伤,其作用机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。

  • 单位
    神经内科