利用CRISPR/Cas9敲除人源细胞系中LMNA基因的研究

作者：刘恒; 李东明; 朱兰玉; 赖乐锦; 闫婉云; 陆玉双; 韦伊; 黄月琪; 方媚; 苏元港; 杨芳; 舒伟^*

来源：遗传, 2019, 41(01): 66-75.

DOI：10.16288/j.yczz.18-146

• LMNA基因
• CRISPR/Cas9
• 293T
• HepG2
• 细胞形态

LMNA基因编码A型和C型核纤层蛋白,参与细胞核核膜的组织,影响基因组稳定性并对细胞分化产生影响。人类肿瘤中LMNA表达异常普遍存在,其突变造成多种核纤层蛋白病,如Emery-Dreifuss肌营养不良症(Emery-Dreifussmusculardystrophy,EDMD)、扩张型心肌病(dilatedcardiomyopathy,DCM)和儿童早老症(Hutchinson-Glifordprogeriasyndrome,HGPS)等。为进一步研究LMNA在细胞内的功能,本研究利用CRISPR/Cas9技术对体外培养的293T与HepG2细胞株的LMNA基因进行编辑,获得两株LMNA基因敲除(LMNA KO)的稳定细胞系。与野生型相比,LMNAKO细胞系增殖能力相对减弱,凋亡增加。同时,细胞形态上也发生显著改变,核膜凹凸不平。本研究首次报道了LMNA KO永生细胞系构建和形态研究结果,为后续LMNA基因功能研究和致病突变体研究奠定基础。

• 单位
  基础医学院; 广西医科大学; 广西师范大学