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摘要
为建立猪圆环病毒2型(PCV2)山西流行毒株Cap蛋白的原核可溶性表达体系，并分析比较重组蛋白与2种商品化基因工程Cap亚单位疫苗在小鼠体内不同阶段的免疫原性，本试验以PCV2e SXJX株(GenBank登录号：MH922991.1)的ORF2基因为基础，根据大肠埃希菌密码子偏性优化序列，将其插入原核表达载体pET-28a-c(+)中，鉴定为阳性后转入宿主菌BL21(DE3)中，经优化表达条件后，对超声破碎后的菌体上清进行纯化，分析纯化后产物的纯度和抗原性，并利用负染透射电镜观察重组Cap蛋白体外自组装成病毒样颗粒(VLPs)。分别将同等免疫剂量的PCV2e重组Cap蛋白和2种商品化PCV2基因工程亚单位疫苗免疫健康BALB/c雌鼠，应用ELISA方法检测不同阶段小鼠体内特异性抗体的水平。结果显示：重组Cap蛋白可在大肠埃希菌中表达，以完全可溶性形式存在于菌体超声波破碎后的上清中，表达产物纯化效果良好，并能被PCV2单克隆抗体识别；透射电镜观察结果发现，表达的重组Cap蛋白可以自组装成约20 mm大小的VLPs;动物免疫试验结果显示，在首免后第21天PCV2e Cap试验组抗体水平显著高于勃林格疫苗组(P<0.05),但极显著低于普莱柯疫苗组(P<0.01),首免后第42天3个免疫组的抗体水平差异不显著(P>0.05),表明重组蛋白在小鼠体内免疫原性良好。本试验成功构建了PCV2e Cap蛋白原核可溶性表达体系，其重组蛋白具有较好的免疫原性，为PCV2的诊断检测和亚单位基因工程疫苗的研制提供了候选抗原，并为该蛋白功能的深入研究提供了科学依据。
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