摘要
目的:基于肿瘤微环境中转移相关因子探索健脾消癌方抑制结肠癌HCT116细胞增殖、侵袭及迁移的作用机制。方法:14只SPF级SD大鼠随机分为无药血清组及健脾消癌方组(10.8 g·kg-1),每组7只,适应性饲养后,灌胃给予相应生理盐水和中药7 d,获取无药血清与健脾消癌方含药血清。HCT116细胞分为空白组、5%无药血清组、10%无药血清组、20%无药血清组、5%健脾消癌方含药血清组、10%健脾消癌方含药血清组、20%健脾消癌方含药血清组,分别处理24 h、48 h、72 h后采用CCK-8实验检测各组细胞的增殖能力,筛选最佳含药血清浓度和干预时间;Transwell实验检测细胞的侵袭及迁移能力;Western Blot及RT-PCR分别检测趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、整合素αv β5(integrin αv β5,ITG αv β5)、血清钙结合蛋白A4(calcium-binding protein A4,S100A4)、血清钙结合蛋白A8(calcium-binding protein A8,S100A8)、血清钙结合蛋白A9(calcium-binding protein A9,S100A9)等肿瘤微环境中转移相关因子的蛋白及mRNA表达水平。结果:不同浓度健脾消癌方含药血清均能抑制HCT116细胞增殖,以20%健脾消癌方含药血清干预细胞48 h的抑制作用最为明显(P<0.001)。与20%无药血清组比较,20%健脾消癌方含药血清能显著抑制HCT116细胞侵袭及迁移,显著降低CXCR4、TGF-β、S100A4、S100A8、S100A9、ITG αv β5的蛋白与mRNA表达水平(P<0.05)。结论:健脾消癌方能抑制结肠癌HCT116细胞增殖、侵袭及迁移,其机制可能与降低CXCR4、TGF-β、S100A4、S100A8、S100A9、ITG αv β5等肿瘤微环境中转移相关因子的表达有关。
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单位湖南中医药大学; 湖南省中医药研究院附属医院; 武汉市中医医院; 江西中医药大学附属医院