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摘要
为了建立一种快速鉴别诊断禽呼肠孤病毒(avian reovirus, ARV)的分子信标环介导等温扩增(LAMP)检测方法，根据ARV S1基因序列的高保守区域设计1套LAMP引物，并取F1c和B1c之间的序列设计分子信标(在5′端标记Cy5荧光基团，3′端标记BHQ-3淬灭基团),通过实时浊度仪，并对反应体系和反应条件进行优化，试验结果通过多通道荧光成像仪进行观察，结果显示：ARV阳性样品在荧光成像仪下显示红色荧光，而其他几种病原样品无荧光显示，建立的ARV分子信标LAMP检测方法仅特异性扩增ARV,与其他几种禽类常见疾病无交叉反应；对ARV的最低检测值为10拷贝/μL;在对22份临床样品的检测中，结果与荧光定量PCR的检测结果一致，将阳性产物进行测序鉴定均为ARV阳性样品。研究建立的ARV分子信标LAMP检测方法，结果可视化，整个试验流程无需开盖，能有效避免气溶胶污染，真正做到了特异性强、灵敏性好、准确性高，可应用于ARV的临床检测。
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