CXCR6介导的NKT细胞激活在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用

作者：徐枫; 张涛; 钟超群; 刘本铨; 梁桦^*; 王汉兵

来源：中华麻醉学杂志, 2021, 41(08): 1005-1009.

• 受体, CXCR
• 自然杀伤T细胞
• 急性肾损伤
• 纤维化

目的 CXC趋化因子受体6(CXCR6)介导的自然杀伤T(NKT)细胞激活在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用。方法雄性野生型C57BL/6小鼠和CXCR6基因敲除型C57BL/6小鼠各18只, 8～10周龄, 体重20～30 g, 采用随机数字表法分为6组(n=6):野生型小鼠对照组(WT-CON组)、CXCR6基因敲除型小鼠对照组(CXCR6-/--CON组)、野生型小鼠急性肾损伤组(WT-AKI组)、CXCR6基因敲除型小鼠急性肾损伤组(CXCR6-/--AKI组)、野生型小鼠急性肾损伤+NKT细胞过继转移组(WT-AKI-NKT组)和CXCR6基因敲除型小鼠急性肾损伤+NKT细胞过继转移组(CXCR6-/--AKI-NKT组)。腹腔注射叶酸250 mg/kg制备急性肾损伤小鼠肾纤维化模型。WT-AKI-NKT组和CXCR6-/--AKI-NKT组分别于注射叶酸后第4和9天时尾静脉注射NKT细胞悬液250 μl(1×106个)。注射叶酸后第14天时, 采取眼眶血标本, 检测血清BUN和Cr浓度。处死小鼠取肾组织, 采用天狼星红染色观察肾纤维化面积, 采用HE染色观察肾损伤情况, 并行肾损伤评分, 采用流式细胞术测定CD1d Tetramer阳性(CD1d Tetramer+)细胞比例, 采用免疫荧光双染法行CD206和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)双阳性(CD206+-α-SMA+)细胞计数, 采用RT-PCR法检测IL-4和IL-13的mRNA表达水平。结果与WT-CON组比较, WT-AKI组和WT-AKI-NKT组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分升高, 肾纤维化面积增加, 肾组织CD1d Tetramer+百分比和CD206+-α-SMA+细胞计数升高, IL-4和IL-13的mRNA表达上调(P<0.05);与WT-AKI组比较, WT-AKI-NKT组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分升高, 肾纤维化面积增加, 肾组织CD1d Tetramer+细胞百分比和CD206+-α-SMA+细胞计数升高, IL-4和IL-13的mRNA表达上调, CXCR6-/--AKI组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分降低, 肾纤维化面积减少, 肾组织CD1d Tetramer+细胞百分比和CD206+-α-SMA+细胞计数降低, IL-4和IL-13的mRNA表达下调(P<0.05);与CXCR6-/--CON组比较, CXCR6-/--AKI组和CXCR6-/--AKI-NKT组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分升高, 肾纤维化面积增加(P<0.05);与CXCR6-/--AKI组比较, CXCR6-/--AKI-NKT组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分升高, 肾纤维化面积增加, 肾组织CD1d Tetramer+细胞百分比和CD206+-α-SMA+细胞计数升高, IL-4和IL-13的mRNA表达上调(P<0.05)。结论 CXCR6介导的NKT细胞激活参与了急性肾损伤小鼠肾纤维化的过程, 其机制可能与促进Th2细胞因子介导的M2巨噬细胞-肌成纤维细胞转化有关。

• 单位
  佛山市第一人民医院