KLF7对创伤性脑损伤海马神经元细胞模型凋亡和增殖的影响

作者：马多; 李文媛; 王晓宇; 喻静; 吕忠孝; 王莹^*

来源：牡丹江医学院学报, 2022, 43(03): 1-29.

DOI：10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2022.03.007

• 创伤性脑损伤
• 细胞模型
• KLF7
• 凋亡
• 海马神经元

目的 探讨KLF7对创伤性脑损伤诱导海马神经元细胞(HT22细胞)增殖、凋亡损伤作用及其机制。方法 HT22细胞培养和TBI体外模型(stretch联合OGD)制备，应用AAV-KLF7、AAV-NC腺病毒转染HT22,将细胞分为control组(未处理细胞)、 SOAN组(stretch+OGD处理后应用AAV-NC转染)、SOAK组(stretch+OGD处理后应用AAV-KLF7转染)、SOAK-AG490)(SOAK组加入AG490)和SOAN-AG490组(SOAN组加入AG490),应用Western blots和qRT-PCR检测各组KLF7及p-JAK2、t-JAK2、p-STAT3、t-STAT3、凋亡因子Bcl-2、Bax和C-caspase3表达水平；免疫荧光染色检测各组KLF7及βⅢ-tubulin表达，乳酸脱氢酶(LDH)活性试剂盒测定各组LDH表达，Caspase-3活性试剂盒检测各组Caspase-3活性；PI免疫荧光染色及CCK-8法检测各组细胞增殖和活性情况；ChIP检测转录因子KLF7与STAT3启动子的结合作用和结合位点。结果 与control组比较，stretch+OGD损伤后KLF7表达、PI阳性细胞百分比、LDH和caspase-3活性、p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值、Bax和C-caspase-3蛋白表达均显著增高；细胞活性、βⅢ-tubulin和Bcl-2表达均显著降低(P<0.05);与SOAN组比较，SOAK组KLF7表达、细胞活性、βⅢ-tubulin和Bcl-2表达、p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值均显著增高，PI阳性细胞百分比、LDH和caspase-3活性、Bax和C-caspase-3蛋白表达均显著降低(P<0.05);SOAK-AG490组PI阳性细胞百分率、LDH和caspase3活性增加，p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3相对表达及细胞活力降低(P<0.05)。SOAN、SOAN-AG490、SOAK-AG490三组间PI阳性细胞百分率、LDH和caspase3活性、Bcl-2、Bax和C-caspase-3蛋白表达和细胞活力无显著性差异(P>0.05)。ChIP结果表明KLF7与p-STAT3之间有直接相互作用。结论 KLF7能够抑制海马神经元TBI损伤细胞模型凋亡，机制可能与上调JAK2/STAT3信号通路表达有关。

• 单位
  厦门医学院; 牡丹江医学院