氧自由基在纳米细菌致肾结石形成过程中的作用

作者:王敬珅; 郝志强; 杨恒; 汪渊; 李永乐; 钱彪*; 郑丽英; 冷欣; 王艳军; 张志强
来源:吉林医学, 2020, 41(09): 2053-2057.

摘要

目的:探究氧自由基在纳米细菌(Nanobacteria,NB)导致肾结石损伤过程中的作用。方法:实验分五组:空白对照组、NB组、一水草酸钙(Calcium oxalate monohydrate,COM)组、纳米级羟基磷灰石(Nanograde hydroxuapatite,nHAP)组和四环素(TET+NB)组。将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6 h、12 h和24 h后,用透射电子显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;超声粉碎细胞后检测Na+/K+ATP酶和Ca2+/Mg2+ATP酶活性;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量;最后加入COM晶体后用激光共聚焦显微镜观察各组细胞的晶体黏附情况。结果:电镜结果可见,nHAP组和四环素组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组。nHAP对HK-2细胞酶活性的抑制作用显著低于NB,四环素组细胞在各时间点的酶活性均高于NB组,差异有统计学意义(P<0. 05)。各时间点,NB组培养液中H2O2和MDA的含量显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05),nHAP组无明显变化(P>0.05),四环素组显著低于NB组,差异有统计学意义(P<0. 05)。随着共培养时间延长,NB组、COM组细胞的晶体黏附量持续增加。当共培养24 h时,nHAP组可观察到少量晶体黏附。各时间点,四环素组中晶体黏附量均显著少于NB组。结论:NB可能通过诱导脂质过氧化反应损伤HK-2细胞,损伤程度和晶体黏附量与NB作用时间成正比,氧自由基物质,可加重过氧化反应,形成恶性循环。四环素可以抑制NB对HK-2细胞的损伤并减少损伤后的晶体滞留。