白细胞介素1受体拮抗剂对二硝基氯苯诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用

作者：郭咏梅; 闫素梅^*; 史彬林

来源：动物营养学报, 2019, 31(10): 4659-4666.

• 白细胞介素-1受体拮抗剂
• 奶牛乳腺上皮细胞
• 炎症因子
• 氧化损伤

本试验旨在探究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)对二硝基氯苯(DNCB)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)氧化损伤的保护作用,并确定抑制白细胞介素-1(IL-1)活性的最佳IL-1Ra浓度。采用完全随机试验设计,将第3代BM EC随机分为12个组,每组6个重复。1组为对照组,利用不含DNCB及IL-1Ra的培养液培养6 h; 2～6组是不同剂量的IL-1Ra处理组,分别利用含有1、5、10、20、50μg/L的IL-1Ra培养液培养6 h; 7组为DNCB损伤组,利用含有300μmol/L的DNCB培养液培养6 h; 8～12组是不同剂量的IL-1Ra保护组,分别利用含有1、5、10、20、50μg/L的IL-1Ra与300μmol/L DNCB培养液培养6 h。结果表明:与对照组相比,经300μmol/L的DNCB作用6 h后,BMEC的相对增殖率(RGR)以及含硒蛋白[硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)]、抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性与总抗氧化能力(T-AOC)均显著降低(P<0.05);同时,诱导型一氧化氮合酶(i NOS)与活性氧(ROS)活性以及一氧化氮(NO)、IL-1、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)含量则呈现相反的变化规律,均显著升高(P<0.05)。300μmol/L DNCB与不同浓度的IL-1Ra同时作用6 h后,BM EC的RGR及抗氧化酶活性随IL-1Ra浓度的增加均呈现升高趋势,其中5、10、20、50μg/L IL-1Ra保护组的上述指标均显著高于DNCB损伤组(P<0.05),并且RGR及CAT、GPx、TrxR活性均以IL-1Ra浓度为10μg/L时最高;同时,IL-1、IL-6、TNF-α与NO含量及i NOS活性则随IL-1Ra浓度增加呈现先降低后升高的趋势,其中5、10、20、50μg/L IL-1Ra保护组的上述指标均显著低于DNCB损伤组(P<0.05),以IL-1Ra浓度为5、10、20μg/L时效果较好。然而,正常的BMEC经过不同浓度的IL-1Ra处理后,上述指标(5μg/L IL-1Ra处理组的TNF-α含量除外)均未发生显著变化(P>0.05)。综上所述,IL-1Ra竞争性与IL-1R结合,抑制了IL-1的活性,进而抑制了DNCB引起的BM EC氧化损伤及炎症反应,本试验条件下以10μg/L为适宜浓度。

• 单位
  动物科学学院; 内蒙古农业大学