柱前衍生化RP-HPLC法测定L-叔亮氨酸含量

作者：陈亭亭; 黄金; 陈蔚青; 王普

来源：浙江工业大学学报, 2016, (04): 431-434.

• 柱前衍生化
• 反相高效液相色谱法
• L-叔亮氨酸 pre-column derivatization
• reversed-phase high performance liquid chromatography
• L-tert-leucine

以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)为手性衍生化试剂,建立一种反相高效液相色谱测定L-叔亮氨酸的方法.以GITC为衍生化试剂对L-叔亮氨酸进行衍生化,优化衍生化试剂用量和衍生化时间等反应条件.使用岛津C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离衍生化产物,流动相为V(甲醇)∶V(磷酸盐)=58∶42的缓冲溶液(pH=2.8),流速为0.6mL/min,检测波长为254nm,柱温30℃,进样量10μL,结果表明叔亮氨酸两个对映异构体的衍生化产物分离良好,在0.2~1.0mmol/L范围内呈现良好的线性关系(r=0.999 6).该方法准确可靠,重现性好...

• 单位
  浙江工业大学; 浙江树人大学