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摘要
为确定青海省刚察县某牧场发生牦牛脾脓肿的病原菌,以便于及时防治,本研究于患病解剖牛的脾脓肿部位进行无菌采样,并进行染色形态观察、16S rRNA基因和lktA基因扩增与序列分析等。结果显示:脾脏脓汁涂片瑞氏染色后在显微镜下呈现紫色、丝状、长短不一的杆菌。基于细菌16S rRNA基因通用引物和lktA基因特异性引物扩增,均得到预期的基因目的片段。经测序后分析,两基因分别与坏死杆菌两种基因参考序列具有较高的同源性,都高达99%以上,此病原在分子生物学上鉴定为坏死杆菌,命名为Fusobacterium necrophorum QHGC;基于16S rRNA基因和lktA基因构建的进化树显示:本研究鉴定的克隆序列(16S rRNA和lktA基因)均与其他F.necrophorum分离株聚在一个分支上,在进化角度鉴定了此菌确实为坏死杆菌。本研究表明引起牦牛脾脓肿的病原菌是坏死杆菌,这为本地区牦牛脾脓肿的病原学研究和流行病学调查提供了初步数据,为牦牛脾脓肿的防治提供了参考依据。
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