羊痘病毒多表位核酸疫苗的构建及表达

作者：陈轶霞; 刘俊林; 王明明; 徐继英; 骆学农

来源：中国兽医学报, 2013, (08): 1196-1200.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.08.026

• 羊痘病毒
• 多表位
• 核酸疫苗
• 真核表达 sheeppox virus and goatpox virus(SGPV)
• multi-epitope
• chimeric gene
• eukaryotic ex pression

结合文献报道并通过计算机软件分析筛选出羊痘病毒(SGPV)A4同源核蛋白和A27、A33、B5、L1同源膜蛋白基因的T、B细胞优势抗原表位共6段,采用人工合成的方法将各抗原表位以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头串联成一条全新的多表位嵌合基因E。将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pcDNA3.1-E质粒。用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;提取转染细胞总RNA,RT-PCR方法检测目的基因的转录。结果所构建的真核表达质粒在BHK-21细胞中能表达目的蛋白,RT-PCR方法检测到目的基因的转...

• 单位
  西北民族大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所