Tim-3在肝癌细胞上皮间质转化及转移中的作用机制

作者：林华鹏; 段艳飞; 马长林; 乔森^*

来源：中国现代普通外科进展, 2019, 22(09): 673-682.

• 肝癌细胞
• 上皮间质转化
• T细胞免疫球蛋白及黏蛋白分子3
• 上皮型钙黏附蛋白
• 神经型钙黏附蛋白

目的:探讨Tim-3与肝癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的关系及对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞SMMC-7721,RT-PCR检测Tim-3表达差异,将SMMC-7721分为3组,对照组:未接受转染的SMMC-7721;实验组转染Tim-3 siRNA细胞低表达Tim-3;阳性对照组转染PEX-3-hTim-3过表达质粒细胞高表达Tim-3。应用RT-PCR、Western blot检测3组肝癌细胞Tim-3及EMT相关基因:E-cadherin、N-cadherin、MMP-9、Twistl、Slug、Snail、Smad mRNA和蛋白的表达。通过Transwell小室侵袭实验检测3组肝癌细胞迁移和侵袭能力改变;分析Tim-3表达与EMT相关基因表达的相关性。结果:(1)与正常肝细胞L02比较;Tim-3在肝癌细胞中高表达(P<0.05);(2)RTPCR和Western bolt结果提示,实验组上皮标志物E-cadherin表达较对照组明显上升(P<0.05),而间质标志物N-cadherin、MMP-9、Twistl、Snail、Slug、Smad表达较对照组下降(P<0.05),提示EMT受到抑制;阳性对照组中E-cadherin表达较对照组下降(P<0.05),N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snai1、Slug、Smad表达较对照组上升(P<0.05),促进了肝癌EMT;(3)Transwell迁移实验中,实验组与对照组和阳性对照组相比较,肝癌细胞迁移和侵袭细胞数明显减少,3组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05),实验说明Tim-3表达水平的改变,影响肝癌的迁移和侵袭性;(4)Tim-3的表达与EMT标志物的表达做相关性分析显示,Tim-3的表达与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05),与N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snai1、Slug、Smad的表达呈正相关(P<0.05)。结论:Tim-3是肝癌细胞EMT的潜在诱导者,抑制Tim-3的表达,同时抑制肝癌细胞EMT的发生,肝癌细胞迁移和侵袭能力下降。因此,Tim-3有望成为今后的临床抗肿瘤药物新的治疗靶点用于改善和评估患者预后。

• 单位
  济宁市第一人民医院