硫醚环化B螺旋肽对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

作者：张雪鹏; 张伟韬; 屠国伟; 邱越; 罗哲^*

来源：中华急诊医学杂志, 2021, 30(07).

• 硫醚环化B螺旋肽
• 脓毒症
• 急性肺损伤
• Caspase-3
• Bax

目的探讨硫醚环化B螺旋肽(thioether-cyclized helix B peptide, CHBP)对脓毒症导致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的保护作用及其潜在机制。方法 30只SPF级6～8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机(随机数字表法)分为三组:空白对照组、脓毒症致ALI组和CHBP预处理组(10 nmol/kg)。在ALI发生18 h后, 通过免疫组化检测肺组织caspase-3阳性表达, 通过免疫荧光检测肺组织TUNEL阳性率。体外培养小鼠肺上皮细胞(MLE-12)并分为对照组、脂多糖(LPS)组和CHBP预处理组(10 nmol/L)。刺激24 h后, ELISA检测细胞上清液的炎症因子水平, 通过荧光TUNEL法检测各组细胞的凋亡比例以及用Western blot检测caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。使用Graphpad prism 7软件对数据进行单因素方差分析。计量资料多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。结果 LPS组小鼠出现明显ALI症状和肺组织病理改变。CHBP预处理组肺组织TUNEL阳性细胞数量(个/mm2)少于LPS组, 差异有统计学意义[(22±2)vs (39.46±4.51), P=0.001]。CHBP预处理组肺组织caspase-3阳性细胞数(个/mm2)少于LPS组[(28.67±5.29)vs (52.87±3.76), P=0.029]。在体外实验中, 相比LPS组, CHBP预处理明显抑制MLE-12细胞上清液炎症因子IL-6(pg/mL)[(70.64±5.59)vs (123.10±15.71), P=0.027], IL-1β(pg/mL)[(67.11±3.39)vs (100.70±7.61), P=0.007]和TNF-α(pg/mL)[(76.98±7.97)vs (138.50±13.12), P=0.007]的表达, 抑制了凋亡相关蛋白caspase-3 [(0.085±0.063)vs (1.198±0.058), P=0.01]以及Bax[(0.562±0.026)vs (0.781±0.044), P=0.041]的表达, 减少细胞凋亡, 并且这一趋势与MLE-12细胞荧光TUNEL检测结果[CHBP预处理组(30.33±1.86)vs LPS组(45.00±2.88), P=0.006]一致。结论 CHBP预处理可以减轻脓毒症导致的ALI, 这一保护作用很可能是通过抑制炎症反应, 减少肺上皮细胞凋亡实现的。

• 单位
  复旦大学附属中山医院