基于小分子-蛋白质相互作用的甘草质量标志物筛选及活性验证

作者：惠玉晶; 于金高^*; 樊修和; 宋忠兴; 唐志书^*; 王梅; 王育朋

来源：中国中药杂志, 2023, 48(20): 5498-5508.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20230629.201

• 甘草
• 质量标志物
• 荧光淬灭法
• 微塑料
• 巨噬细胞

为了解决甘草质量控制成分与功效关联性不强的问题，该研究通过荧光淬灭法检测甘草药材中小分子化学成分与小鼠各脏器总蛋白的相互作用，筛选潜在的活性成分；以HPLC检测甘草中27种化学成分并计算其在34批甘草药材中的缺失率；结合成分有效性和可测性原则共同筛选甘草潜在质量标志物(Q-marker)。再采用微塑料诱导RAW264.7巨噬细胞损伤模型，以CCK-8和Griess法检测细胞活力和一氧化氮含量，采用ELISA法等检测炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、CRP)和氧化应激标志物(SOD、MDA、GSH)水平，验证质量标志物的活性。发现甘草中不同化学成分与各脏器蛋白之间的相互作用强度各不相同，体现出不同的脏器选择性，并筛选出18个活性较强的成分；结合成分HPLC色谱峰信噪比和批间稳定性，最终筛选出芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素以及甘草酸铵等7个化学成分作为甘草药材的潜在质量标志物。体外实验表明，甘草质量标志物可剂量依赖性缓解微塑料诱导的RAW264.7细胞损伤，抑制细胞炎症因子分泌，减轻细胞氧化应激，且在总剂量相同的条件下，各化学成分合用与单用相比，能够协同增强抗炎、抗氧化作用。该研究确定了与甘草抗炎抗氧化功效相关的质量标志物，可为提高甘草质量控制标准提供参考依据。

• 单位
  中国中医科学院望京医院; 陕西中医药大学