1-磷酸神经酰胺转运蛋白对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响

作者：张湘豫; 胡溢洪; 韩语诚; 邹先琼^*

来源：吉林大学学报(医学版), 2023, 49(04): 875-883.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20230407

• 口腔鳞状细胞癌
• 1-磷酸神经酰胺转运蛋白
• 细胞侵袭
• 信号通路

目的：探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白(CPTP)对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响，阐明其相关作用机制。方法：体外培养HSC-3细胞，分为对照组和实验组，分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染，采用抗性筛选法构建稳定转染(稳转) CPTP的细胞。采用Western blotting法和免疫荧光法检测2组细胞中CPTP蛋白表达水平，采用克隆形成实验和CCK-8法检测各组细胞中克隆形成数和细胞增殖活性，细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell小室实验检测2组细胞中侵袭细胞数。小鼠随机分为对照组和实验组，分别注射pFlag-CMV4稳转HSC-3细胞和pFlag-CPTP稳转HSC-3细胞，制备小鼠皮下移植瘤模型，检测2组小鼠移植瘤体积和质量。采用生物信息学方法对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)组织中CPTP差异表达基因进行富集分析。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组细胞中p53、血小板反应蛋白1 (THBS1)和细胞周期蛋白G2 (CCNG2) mRNA表达水平。结果：与对照组比较，实验组细胞中CPTP蛋白表达量明显增加。与对照组比较，实验组细胞中克隆形成数明显增加(P<0.01)，细胞增殖活性和划痕愈合率明显升高(P<0.05或P<0.01)，侵袭细胞数明显增加(P<0.01)。注射肿瘤细胞2、3和4周，与对照组比较，实验组小鼠移植瘤体积明显增加(P<0.05或P<0.01)；注射肿瘤细胞4周，与对照组比较，实验组小鼠移植瘤质量明显增加(P<0.05)。生物信息学分析，在HNSCC组织中CPTP的作用可能是通过p53等信号通路介导。与对照组比较，实验组细胞中p53、THBS1和CCNG2 mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论：过表达CPTP能促进HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭和成瘤能力，CPTP通过抑制p53信号通路促进口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生长。

• 单位
  基础医学院; 桂林医学院