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摘要
目的 观察抑制核转录因子Gli1表达对人肺腺癌耐顺铂细胞株的顺铂耐药性逆转作用。方法 将人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP随机分为GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组，其中GANT61组加入10μmol/L的Gli1抑制剂GANT61，环杷明组加入10μmol/L的Smo抑制剂环杷明，LY294002组加入20μmol/L的PI3K抑制剂LY294002，对照组加入培养基。各组细胞继续培养48 h后，采用实时荧光定量PCR法和Western Boltting法检测细胞中Gli1 mRNA和蛋白，采用MTT法测算顺铂对各组细胞的半数抑制浓度(IC50)，采用Western Boltting法检测细胞中多药耐药相关蛋白(MRP1)及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax，采用Annexin V-FITC法测算各组细胞凋亡率。结果 GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Gli1 mRNA相对表达量分别为0.30±0.08、0.62±0.12、0.68±0.11、1.05±0.10，其中环杷明组与LY294002组相比，P>0.05；其余组间两两相比，P均<0.05。GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Gli1蛋白相对表达量分别为0.28±0.12、0.59±0.07、0.55±0.13、0.97±0.06，其中环杷明组与LY294002组相比，P>0.05；其余组间两两相比，P均<0.05。顺铂对GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞的IC50值分别为(7.35±1.03)、(9.86±0.71)、(10.23±1.02)、(14.26±2.10)μg/mL，其中环杷明组与LY294002组相比，P>0.05；其余组间两两相比，P均<0.05。GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组MRP1蛋白的相对表达量分别为0.18±0.09、0.38±0.17、0.58±0.19、0.83±0.24，组间相比，P均<0.05。GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞凋亡率分别为27.27%±0.99%、15.45%±1.01%、12.35%±1.80%、6.25%±0.38%，其中环杷明组与LY294002组相比，P>0.05；其余组间两两相比，P均<0.05。GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Bcl-2蛋白的相对表达量分别为0.15±0.08、0.33±0.15、0.63±0.13、0.91±0.19，组间相比，P均<0.05。GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Bax蛋白的相对表达量分别为1.88±0.38、1.34±0.25、1.27±0.39、0.64±0.18，其中环杷明组与LY294002组相比，P>0.05；其余组间两两相比，P均<0.05。结论 抑制Gli1表达可通过降低顺铂对A549/DDP细胞的IC50、促进A549/DDP细胞凋亡，逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性；Smo抑制剂环杷明、PI3K抑制剂LY294002、Gli1抑制剂GANT61均可抑制A549/DDP细胞中Gli1的表达。
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