科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 分析影响诱导人诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cells,hiPSCs）向内皮细胞分化的因素及其机制，探索提高hiPSCs向内皮细胞分化效率的诱导方法。方法 利用3阶段法诱导hiPSCs向内皮细胞定向分化，首先通过激活Wnt信号通路以启动中胚层分化，而后由VEGF、FGF2、BMP4诱导细胞分化为血管前体细胞，最后在VEGF作用下分化为成熟的内皮细胞。期间利用qRT-PCR检测一系列分化相关基因的表达，通过qRT-PCR、细胞免疫荧光、流式细胞术、成管实验验证细胞分化效果。通过VEGF、FGF2、BMP4两两配伍，比较细胞因子对诱导分化的影响；再进一步验证ERK和PI3K通路抑制剂对内皮诱导分化的影响；同时利用细胞免疫荧光分析不同起始细胞密度对诱导分化效果的影响。结果hiPSCs可诱导分化为内皮细胞；VEGF、FGF2、BMP4三者联合具有高效内皮诱导分化效果；相较于PI3K，抑制ERK信号通路可显著抑制内皮分化效率，促进hiPSCs向平滑肌样细胞分化；低起始细胞密度更有利于提高内皮分化效率。结论 VEGF、FGF2、BMP4联合诱导可取得最佳诱导效果，其中ERK是介导hiPSCs向内皮分化的重要信号通路。
- 单位
