微小RNA-33b-5p靶向ETS1在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用

作者：李文磊; 付强; 刘攀; 张旭; 罗乾坤; 禹鹏飞; 秦涛^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(02).

• 胰腺癌
• 吉西他滨
• 耐药

目的探讨微小RNA-33b-5p(miR-33b-5p)靶向E26转录因子-1(E26 transformation specific-1, ETS1)在胰腺导管腺癌(PDAC)吉西他滨耐药中的作用。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测胰腺癌细胞ASPC-1和胰腺癌耐药细胞ASPC-1/GEM中miR-33b-5p和ETS1的表达水平, 双荧光素酶报告实验验证miR-33b-5p与ETS1之间的靶向关系;免疫组织化学染色检测PDAC患者敏感组与抵抗组ETS1的表达;转染ASPC-1/GEM细胞, 分为NC mimic组、miR-33b-5p mimic组、ETS1小干扰RNA(siRNA) NC组及ETS1 siRNA组, RT-qPCR检测转染后miR-33b-5p、ETS1 mRNA的表达水平, Western blot检测ETS1的表达水平, 细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性并计算吉西他滨半数抑制浓度(IC50), 流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果与ASPC-1细胞比较, ASPC-1/GEM细胞株中miR-33b-5p表达下降(t=-11.011, P<0.05)、ETS1表达升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验表明miR-33b-5p可明显降低野生型ETS1-33b-5p-WT载体荧光素酶活性(t=-4.453, P<0.05);免疫组织化学结果显示ETS1在抵抗组中表达量明显高于敏感组(8.11±2.80比2.78±0.83, P<0.05);miR-33b-5p mimic组IC50明显低于NC mimic组[(25.10±1.77)μmol/L比(43.63±3.04) μmol/L, t=-9.110, P<0.05], miR-33b-5p表达量明显高于NC mimic组(t=19.444, P<0.05), ETS1的表达量明显低于NC mimic组(P<0.05), 凋亡率明显高于NC mimic组[(18.8±1.9)%比(5.3±0.4)%, t=12.239, P<0.05];ETS1 siRNA组吉西他滨IC50明显低于ETS1 siRNA NC组[(20.39±0.89) μmol/L比(37.38±2.62) μmol/L, t=-10.628, P<0.05]。结论 miR-33b-5p可能通过抑制ETS1表达促进PDAC对吉西他滨化疗的敏感性。

• 单位
  河南省人民医院; 郑州大学