尿液标本的双向电泳技术优化

作者：林伟苗; 邱芳华; 梁冬艳; 李秋明; 薛志锋

来源：中国热带医学, 2015, 15(09): 1040-1043.

DOI：10.13604/j.cnki.46-1064/r.2015.09.03

• 尿液
• 双向电泳
• 超滤沉淀法
• 蛋白组学

目的通过摸索尿液的蛋白制备的实验步骤,总结一套适用于尿液的蛋白制备方案及其双向凝胶电泳技术,提高尿液标本2D gel(Two-dimensional polyacrylamide ge,双向电泳胶)的质量。方法对双向电泳实验中的关键环节如蛋白的沉淀,高峰度蛋白的去除等进行实验优化,热考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较。结果采用超滤法沉淀蛋白,并结合血清亲和法试剂盒(Albumin and IgG remove kit)去除高峰度蛋白,可以得到分辨率高、约700个蛋白点数的2D胶,质谱鉴定出Tubulin alpha chain-like 3及Tropomyosin beta chain两个蛋白。结论对超滤沉淀后的蛋白,应用血清亲和法试剂盒(Albumin and IgG remove kit),去除尿液高峰度蛋白,可大大提高尿液标本2D胶的质量,质谱鉴定结果也提示所分离的蛋白与肾脏疾病相关。以上为肾脏疾病蛋白质组学研究奠定基础。

• 单位
  广州市中医医院