胰腺再生蛋白Ⅲγ在猪小肠上皮细胞中的表达调控机理

作者：宋云云; 孟江海; 刘丹; 曹斌; 赵越雯; 田燕涛; 陈韬^*

来源：湖南农业大学学报(自然科学版), 2022, 48(02): 215-221.

DOI：10.13331/j.cnki.jhau.2022.02.014

• 胰腺再生蛋白Ⅲγ(RegⅢγ)
• 金黄色葡萄球菌
• 肽聚糖(PG)
• 核转录因子κB(NF–κB)
• 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)
• 猪小肠上皮细胞(IPEC–J2)

选取不同浓度(0、104、105、106、107、108、109 cfu/mL)的灭活金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和不同质量浓度(0.0、0.1、1.0、10.0μg/mL)的肽聚糖(PG)诱导猪小肠上皮细胞(IPEC–J2)，通过q PCR和免疫印迹试验，检测RegⅢγmRNA和蛋白的表达水平，分析RegⅢγ及P65、P38、c–Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)等的表达变化，进一步探究RegⅢγ表达调控的分子机理。结果表明：灭活S.aureus和PG对IPEC–J2的细胞活力均有抑制作用；与不添加灭活S.aureus处理相比，添加灭活S.aureus可增加RegⅢγmRNA和蛋白的表达，且呈现剂量依赖性，当灭活S.aureus浓度达到109 cfu/mL时，RegⅢγmRNA和蛋白的表达水平极显著增加；同样PG也能诱导RegⅢγ蛋白的表达，与不添加PG的处理相比，添加1.0μg/mL PG时，RegⅢγmRNA和蛋白表达水平极显著升高；与不添加灭活S.aureus或PG的处理相比，添加109 cfu/mL灭活S.aureus或1.0μg/mL PG能显著或极显著提高IPEC–J2的P65、P38、JNK、ERK等蛋白的表达水平，表明RegⅢγ在IPEC–J2中的表达可能是由髓样分化初级应答蛋白(MyD88)下游的核转录因子κB(NF–κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 2条信号通路途径所调控。

• 单位
  湖南农业大学