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摘要
目的 建立通用型人类呼吸道合胞病毒RT-RPA检测方法，完成呼吸道合胞病毒快速诊断。方法 分析比较175株A型、B亚型呼吸道合胞病毒全基因组序列，针对保守的M基因设计合成符合重组酶聚合酶扩增（RPA）要求的通用型引物和探针，优化反应体系和条件，建立实时荧光RT-RPA检测方法，进行敏感性和特异性验证及临床样品的检测，评价方法的检测能力。结果 成功建立了通用型呼吸道合胞病毒RT-RPA检测方法，最佳引物浓度210 nmol/L，探针浓度120 nmol/L，最佳反应温度41℃，20 min完成检测，最低检测限为10拷贝/μl，且与流感病毒、新冠病毒、鼻病毒、副流感病毒等无交叉反应；检测20份呼吸道合胞病毒阳性样本，与实时荧光RT-PCR检测结果的符合率为100%。结论 建立的通用型呼吸道合胞病毒RT-RPA检测方法是一种敏感、特异的快速检测呼吸道合胞病毒的方法 ，为口岸现场快速检测呼吸道合胞病毒提供了新工具。
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单位基础医学院; 青岛大学
