组蛋白去乙酰化酶抑制剂Chidamide抑制C2C12骨骼肌细胞分化及其机制

作者：张露露; 郭洋; 王新莉; 牛文彦^*

来源：天津医科大学学报, 2023, 29(02): 142-147.

• 组蛋白去乙酰化酶抑制剂
• 骨骼肌
• 肌原纤维
• 分化

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达苯胺（Chidamide）对C2C12小鼠骨骼肌细胞分化作用及其分子机制。方法：CCK-8(cell counting Kit-8)法检测0、0.5、1、2、4μmol/L Chidamide处理后C2C12细胞的活力；将C2C12骨骼肌细胞分为对照组（control）和Chidamide组，Western印迹检测Chidamide处理后组蛋白H3乙酰化（Pan-acetyl H3）水平，细胞免疫荧光染色肌管细胞分化成熟标志蛋白肌球蛋白重链（MyHC），检测肌细胞分化，Western印迹和qPCR检测MyHC、成肌分化抗原（MyoD）、肌细胞生成素（MyoG）的表达及肌原纤维Ⅰ型（Myh7）、Ⅱa型（Myh2）、Ⅱb型（Myh4）和Ⅱx型（Myh1）的表达。结果：0、0.5、1、2、4μmol/L的Chidamide均不影响细胞活力。Chidamide升高Pan-acetyl H3蛋白水平（t=3.22,P<0.05）。细胞免疫荧光结果显示，与对照组相比，Chidamide处理后肌细胞融合受损，分化程度降低。Western印迹和qPCR结果显示，与对照组相比，Chidamide下调MyHC、MyoD和MyoG蛋白水平（t=5.71、6.05、7.37，均P<0.01）和mRNA水平（t=26.87、5.81、4.86，均P<0.01）；降低Myh7蛋白（t=3.93,P<0.01）和mRNA水平（t=4.85,P<0.01）；降低Myh1、Myh2蛋白（t=14.13、5.05，均P<0.01）和mRNA水平（t=15.48、16.82，均P<0.001），但不影响Myh4的蛋白（t=2.19,P>0.05）和mRNA水平（t=1.50,P>0.05）。结论：Chidamide可能通过下调MyoD和MyoG的表达抑制C2C12骨骼肌细胞分化，且主要抑制Ⅰ型、Ⅱa和Ⅱx型肌原纤维，不影响Ⅱb型肌原纤维。

• 单位
  基础医学院; 天津医科大学