幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞m6A甲基化水平及相关酶表达的影响

作者:桂书琴; 何小凤; 吴丽霞; 赵艳; 王琴容; 周建奖; 谢渊*
来源:安徽医科大学学报, 2023, 58(10): 1639-1645.
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.10.005

摘要

目的 研究幽门螺杆菌(Hp)感染胃上皮细胞中N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平及相关酶FTO、METTL3和YTHDF2的表达变化,并使用在线网站分析其在胃癌中的表达和临床意义。方法 Hp GZ7菌株感染正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞AGS,感染复数为30∶1,24 h后收集细胞总RNA和总蛋白,斑点杂交实验检测细胞总RNA的m6A修饰水平,q-PCR和Western blot检测FTO、METTL3和YTHDF2的mRNA和蛋白表达。GEPIA网站分析FTO、METTL3和YTHDF2在胃癌组织和正常组织中的表达差异及其在Stage分期中表达,Kaplan-Meier Plotter分析FTO、METTL3和YTHDF2表达与预后的关系。结果 与未感染组比较,Hp感染GES-1和AGS细胞中总RNA m6A修饰水平均明显降低,FTO的mRNA和蛋白表达水平增加,METTL3和YTHDF2的mRNA和蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中FTO表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),YTHDF2表达水平高于正常组织,METTL3表达水平低于正常组织,差异无统计学意义。FTO和METTL3表达较高的胃癌患者有较低的生存率,而YTHDF2高表达患者有较高的生存率。FTO表达与患者的Stage分期显著相关(P<0.05),而METTL3与YTHDF2表达与Stage分期无显著相关性。结论 Hp感染可引起细胞m6A水平及相关酶FTO、METTL3和YTHDF2表达改变,提示m6A甲基化可能在Hp诱导胃癌发生发展中发挥作用。

全文