泛素结合酶E2T对卵巢癌细胞增殖的影响

作者：林文毅; 欧阳慧; 翁美娟

来源：中国优生与遗传杂志, 2022, 30(07): 1150-1155.

DOI：10.13404/j.cnki.cjbhh.2022.07.021

• 泛素结合酶E2T
• 卵巢癌
• 增殖
• 蛋白激酶B
• 细胞周期蛋白D1

目的 观察泛素结合酶E2T(UBE2T)对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响，并探讨其机制。方法 构建UBE2T-shRNA和携带UBE2T基因的慢病毒载体，将其转染至经过培养传代的人卵巢癌细胞株SKOV3，筛选稳定株，分别记为下调组、上调组；另转染NC-shRNA阴性对照慢病毒载体至人卵巢癌细胞株SKOV3，记为阴性对照组；并取未转染的人卵巢癌细胞株SKOV3，记为空白对照组。培养72 h。噻唑蓝（MTT）法、流式细胞仪、反转录-实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹法（WB）分别检测细胞增殖抑制率、细胞周期、UBE2T及其下游相关基因和蛋白表达。结果 下调组细胞增殖抑制率、G1期细胞占比均高于其余3组（P<0.05）,S期和G2期细胞占比、UBE2T、蛋白激酶B(AKT)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA及蛋白表达、p-AKT水平均低于其余3组（P<0.05），上调组细胞增殖抑制率、G1期细胞占比均低于阴性对照组与空白组（P<0.05）,S期和G2期细胞占比、UBE2T、AKT、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达、p-AKT水平均高于阴性对照组与空白组（P<0.05）。结论 UBE2T基因下调可抑制人卵巢癌细胞株SKOV3增殖。