固定化扁桃酸消旋酶的制备及其性能

作者:汪千慧; 刘梦灵; 覃燕梅; 张文涛; 赵俊杰; 顾佳黎*; 孙来玉
来源:湖州师范学院学报, 2022, 44(04): 40-45.

摘要

为克服游离扁桃酸消旋酶的稳定性差、不易回收等缺陷,以镍离子螯合的琼脂糖微球为载体,对扁桃酸消旋酶进行固定化实验.由SDS-PAGE电泳显示,镍离子螯合的琼脂糖微球能专一性地从粗酶液中吸附扁桃酸消旋酶.以偶联效率、蛋白结合率、相对活力和活力回收等为指标,考察给酶量的影响,结果显示:当给酶量为12 mg蛋白/g微球时,固定化效果最佳;固定化酶最佳的反应温度为30℃、pH为8.0、底物浓度为80 mM;与游离酶相比,固定化酶对温度和底物的耐受性均有提高;固定化酶操作稳定性好,在循环使用30批次后,残余酶活为首次固定化酶酶活的60%左右.