重组逆转录病毒载体介导人ANGPTL4基因的抗肝癌作用

作者：刘颖斌; ***; 王建伟; 李江涛; 钱浩然; 冯雪冬; 朱锦辉; 王俊; 蔡炜龙; 彭淑牖

来源：中华普通外科杂志, 2006, (01): 51-54.

• 肝肿瘤
• 基因,抑制,肿瘤
• 血管生成素样4
• 逆转录病毒载体

目的构建重组逆转录病毒载体pMSCV-ANGPTL4,并检测该重组逆转录病毒载体所介导的人ANGPTL4基因的抗肿瘤作用。方法将ANGPTIA cDNA亚克隆至逆转录病毒载体质粒 pMSCV。用脂质体法将重组病毒pMSCV-ANGPTL4转染HepG2细胞。流式细胞术和荧光显微镜检测 HepG2细胞绿色荧光蛋白的表达。RT-PCR法检测ANGPTL4 mRNA的表达。检测HepG2细胞体内外生长情况。结果重组病毒pMSCV-ANGPTL4和空病毒pMSCV的病毒滴度分别为1．4×106和 1．5×106感染性病毒颗粒／ml。表达GFP的HepG2-ANGPTL4细胞组和HepG2-pMSCV细胞组的阳性细胞率分别为68．45％和77．72％。HepG2-ANGPTL4细胞组和HepG2-pMSCV细胞组的平均荧光强度比对照组HepG2细胞分别高31．68倍和64．87倍。HepG2-ANGPTL4细胞组ANGPTL4 mRNA的表达分别是HepG2-pMSCV细胞组和HepG2细胞组的154％和161％。HepG2-ANGPTL4细胞组的体外增殖速度较之HepG2-pMSCV细胞组和HepG2细胞组明显降低(P<0．01)。HepG2-ANGPTL4细胞荷瘤裸鼠肿瘤的平均体积和重量均较HepG2-pMSCV细胞组和HepG2细胞组明显降低(P<0．01)。结论获得稳定转染ANGPTL4基因的人肝癌细胞株HepG2-ANGPTL4。重组逆转录病毒载体所介导的人 ANGPTL4基因转移很可能是一种有效的肝癌基因治疗方式。

• 单位
  浙江大学; 宁波市第二医院