细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应

作者：李春杰; 赵建; 张世勇; 潘微彤; 蒲韵竹; 贾启燕; 查晓丹; 尚艳楠; 黄春倩; 刘艳琴; 钟玉绪; 李前; 丁日高; 付爱玲; 赵宝全

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2014, 28(06): 870-877.

DOI：10.3867/j.issn.1000-3002.2014.06.009

• 细胞色素P450 CYP3A65
• 斑马鱼,转基因
• 铜
• 镉
• 锌
• 多氯联苯化合物

目的建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属(铜、镉、锌)及类二噁英化合物五氯联苯(PCB126)等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列,构建于p T2AL200R150G转座载体克隆位点,将p Tol2-CYP3A65-EGFP质粒与p CS-TP转座酶m RNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞,通过荧光筛选,遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系Tg(CYP3A65-EGFP);利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系,绿色荧光在肝和消化道表达;该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后,铜0.1和0.2μmol·L-1、镉0.35和0.7μmol·L-1组、锌1.5和3μmol·L-1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强(P<0.01);铜0.9μmol·L-1组、镉2.7和5.4μmol·L-1组及锌24μmol·L-1组荧光相对表达量显著减弱(P<0.01);染毒168 h后,铜0.1和0.2μmol·L-1组、镉0.35和0.7μmol·L-1组、锌1.5和3μmol·L-1组及PCB126 232μmol·L-1浓度组荧光相对表达量显著增强(P<0.01),铜0.9μmol·L-1组、镉2.7和5.4μmol·L-1组、锌12和24μmol·L-1组荧光相对表达量减弱(P<0.05),随着浓度增加荧光减弱,呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。

• 单位
  西南大学; 军事医学科学院毒物药物研究所; 通辽市科尔沁区第一人民医院