濒危树种格氏栲ISSR-PCR反应体系的建立

作者：林义君; 刘金福; 潘东明; 洪伟; 吴则焰

来源：福建林学院学报, 2011, 31(2): 115-119.

DOI：10.3969/j.issn.1001-389X.2011.02.005

• 格氏栲
• 简单重复序列区间-聚合酶链式反应
• 体系优化

以濒危珍稀树种格氏栲为材料,对ISSR反应体系中的各个主要影响因子进行优化筛选.首次建立可用于格氏栲ISSR-PCR分析的反应体系:20μL PCR反应体系中包括1ng·μL-1模板DNA,0.10 mmo1·L-1dNTP,2.0μL 10×PCR buffer (缓冲液),0.2μmol·L-1引物,0.037 5 U·μL-1 Taq酶,11.3μL ddH2O,2.0 mmol·L-1 MgCl2.扩增程序:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,复性45 s,72℃延伸1.5 min,循环34次,最后72 ℃延伸10,min,4 ℃保存.

• 单位
  生命科学学院; 福建农林大学