NRAGE对肠上皮细胞凋亡的影响

作者：冯奇; 胡远亮; 邹贵军; 张朝军

来源：四川大学学报（医学版）, 2017, 48(04): 556-565.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2017.04.010

• NRAGE
• 缺血再灌注损伤
• 肠上皮细胞
• 细胞凋亡

目的探讨神经生长因子受体作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog,NRAGE)是否参与肠缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)损伤的过程及其对肠上皮细胞凋亡及occludin蛋白的影响。方法制备SD大鼠小肠I/R损伤模型,取肠组织行免疫组化染色,观察NRAGE蛋白的表达变化;体外肠上皮永生化细胞株IEC-6给予缺氧及复氧后观察细胞NRAGE的表达变化;将NRAGE过表达慢病毒(Lv-NRAGE组)、NRAGE干扰表达慢病毒(sh-NRAGE组)及对照慢病毒(Lv-control组)感染IEC-6细胞,并设置不加慢病毒的对照组(NC组),Western blot及RT-PCR观察各组细胞NRAGE蛋白及mRNA的表达变化,流式细胞术观察各组IEC-6细胞的凋亡情况,Western blot观察感染慢病毒后紧密连接蛋白occludin蛋白的表达变化。结果 I/R损伤后肠黏膜上皮细胞NRAGE表达较sham组升高(P<0.01);体外IEC-6细胞缺氧6h后NRAGE蛋白的表达增加(P<0.01),NRAGE mRNA表达升高(P<0.01)。感染慢病毒48h后,相比于Lvcontrol组,Lv-NRAGE组早期凋亡率增加(P<0.01),occludin蛋白表达降低(P<0.01),sh-NRAGE组早期凋亡率降低(P<0.01),occludin蛋白表达增高(P<0.001)。结论 NRAGE参与了I/R损伤过程,并促进肠上皮细胞凋亡,降低occludin蛋白的表达。

• 单位
  第三军医大学西南医院; 中国人民解放军海军总医院