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摘要
目的 明确组蛋白去甲基化酶5B(lysine-specific demethylase 5B,KDM5B)在喉癌中的表达情况，探讨其对喉癌Hep-2细胞增殖的影响及相关机制。方法 收集121例喉癌患者手术切除组织标本和60例癌旁组织标本，对KDM5B表达量进行免疫组化分析，了解KDM5B表达与各临床因素间的关系。设计重组KDM5B-shRNA干扰表达质粒，并转染入Hep-2细胞内。研究分为空白组、NC-shRNA组和KDM5B-shRNA组。qRT-PCR检测KDM5B mRNA表达水平，CCK-8法观察细胞增殖能力的变化，平板克隆形成实验观察单克隆集落的形成，流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡情况，Western-blot检测KDM5B、H3K4me3、p21、p27、CyclinD1、CDK4等蛋白的表达情况。结果 KDM5B在喉癌组织中的表达明显高于癌旁组织（P=0.000），与病理类型（P=0.007）、临床分期（P=0.002）和淋巴结转移（P=0.000）均有关。KDM5B-shRNA组细胞内KDM5B mRNA水平明显低于空白组和NC-shRNA组（P<0.01）。随着转染时间的持续延长，KDM5B-shRNA组细胞的吸光度值与空白组和NC-shRNA组相比均有较大差异（P=0.000），且KDM5B-shRNA组细胞的单克隆集落数明显减少（P=0.000）。KDM5B蛋白表达被抑制后，CyclinD1和CDK4蛋白表达随转染时间延长均逐渐减少，而H3K4me3、p21和p27蛋白表达量则均逐渐升高。与空白组和NC-shRNA组相比，KDM5B-shRNA组细胞的G1期分布明显升高，而S期和G2期分布比例均明显降低，细胞凋亡率也明显升高（P均=0.000）。结论 KDM5B参与喉癌增殖的调控，可作为一个潜在治疗喉癌的靶点。
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