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摘要
目的研究遗传印记基因PEG10蛋白在大肠癌细胞中的亚细胞定位,探讨PEG10在大肠癌侵袭、生长中的作用机制。方法应用激光扫描共聚焦显微镜成像方法检测PEG10蛋白在大肠癌细胞中的亚细胞定位;构建siPEG10干扰质粒,高效稳定转染至大肠癌细胞系SW620,采用嘌呤霉素对干扰质粒细胞株进行筛选;利用Westernblot法检测PEG10基因在蛋白水平的表达情况;通过Transwell小室技术探讨PEG10对SW620细胞侵袭和生长的影响;分组构建动物模型,把PEG10-siRNA后的SW620细胞在C57BL/6小鼠皮下进行注射,观察其移植瘤的增长情况。结果激光扫描共聚焦显微镜成像显示PEG10主要定位在细胞质;成功构建了PEG10的干扰质粒;Western-blot方法验证了细胞株中PEG10基因表达有效的被抑制;Transwell小室实验显示干扰PEG10后大肠癌细胞SW620侵袭能力减弱;在体内实验中,注射干扰PEG10后大肠癌细胞SW620的小鼠皮下瘤体较对照组小。结论 PEG10在体内外对小鼠大肠癌细胞SW620的侵袭和生长能力有促进作用。
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单位中国人民解放军第一七四医院
