MiR-381通过靶向基质细胞衍生因子-1对多发性肌炎组织浸润的巨噬细胞的作用机制

作者：陈昭英; 洪文轲

来源：解剖学报, 2022, 53(02): 183-189.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2022.02.007

• 多发性肌炎
• 基质细胞衍生因子-1
• 巨噬细胞浸润
• 免疫组织化学
• 双荧光素酶报告基因实验
• 小鼠

目的 探讨miR-381通过靶向基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对多发性肌炎(PM)组织浸润的巨噬细胞的作用机制。方法 通过兔肌球蛋白(1.5 mg)、结核分枝杆菌(5 mg)和百日咳毒素(500 ng)构建PM小鼠模型。将30只PM模型小鼠随机分为PM组和PM+miR-381组(每组15只),另取同期15只健康小鼠作为对照组。PM+miR-381组小鼠腹腔内注射miR-381 agomir(300μg)2周。检测和比较各组小鼠血清中血清肌酸激酶(s-CK)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平及肌肉组织病理学变化。通过免疫组织化学染色检测巨噬细胞标志蛋白F4/80,评估组织中浸润的巨噬细胞情况，检测各组肌肉组织中miR-381、SDF-1 mRNA和蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-381和SDF-1的靶向关系。将小鼠巨噬细胞分为miR-381 NC组和miR-381 mimics组，通过转染miR-381 mimics过表达miR-381,通过Real-time PCR和Western blotting检测各组SDF-1 mRNA和蛋白水平，通过Transwell实验检测细胞迁移水平评估侵袭能力。结果 动物实验上述指标3组间差异显著(P<0.05)。PM组肌肉组织中miR-381水平显著低于对照组，s-CK、IL-1β、IL-6、组织学评分、组织中浸润的巨噬细胞情况、SDF-1 mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。PM+miR-381组肌肉组织中miR-381水平显著高于PM组，s-CK、 IL-1β、IL-6、组织学评分、组织中浸润的巨噬细胞情况、SDF-1 mRNA和蛋白表达水平显著低于PM组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果表明，miR-381可以与SDF-1靶向结合。细胞实验结果表明，miR-381 mimics组巨噬细胞中的SDF-1 mRNA和蛋白表达水平显著低于miR-381 NC组(P<0.05)。MiR-381 mimics组的迁移细胞数目显著低于miR-381 NC组(P<0.05)。结论 提高miR-381水平可通过靶向抑制SDF-1的表达而抑制巨噬细胞的炎性浸润能力，从而缓解PM。

• 单位
  中国科学院大学