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摘要
目的探讨牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)内化牙周膜干细胞对成骨分化能力的影响。方法通过组织块法培养原代牙周膜细胞,有限稀释法克隆纯化牙周膜干细胞。设立未成骨诱导分化的牙周膜干细胞为空白对照组,成骨诱导分化牙周膜干细胞为阳性对照组,成骨诱导分化并内化P. gingivalis的牙周膜干细胞为内化组。茜素红染色观察牙周膜干细胞矿化结节的形成能力,测定碱性磷酸酶(ALP)活性。实时定量PCR方法检测Runx相关转录因子2 (Runx2)和骨钙素(OCN)基因的表达。结果牙周膜细胞以组织块为中心呈放射状、旋涡状单层生长,有限稀释克隆传代后牙周膜干细胞生长状态良好。茜素红染色结果显示,阳性对照组和内化组牙周膜干细胞均可形成矿化结节。阳性对照组矿化结节大而多,而内化组矿化结节少而稀疏。阳性对照组和内化组牙周膜干细胞ALP活性较空白对照组升高,内化组ALP活性低于阳性对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。空白对照组牙周膜干细胞Runx2和OCN基因表达在第7和14天无明显变化,阳性对照组和内化组牙周膜干细胞Runx2和OCN基因表达较空白对照组上调,且内化组牙周膜干细胞Runx2基因表达低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论牙周膜干细胞体外经过成骨诱导后可以分化成成骨细胞,形成矿化结节,P. gingivalis ATCC 33277内化牙周膜干细胞后可以抑制其成骨分化的能力。
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单位中国医科大学附属口腔医院; 中心实验室; 中国医科大学
