MicroRNA-4516、MicroRNA-198在视网膜母细胞瘤Y79细胞中的表达及其意义

作者：李萍; 卢跃兵; 孙爽; 刘婷; 孙先桃; 余继锋^*

来源：眼科新进展, 2022, 42(03): 200-204.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0040

• 视网膜母细胞瘤
• MicroRNA-4516
• MicroRNA-198
• 细胞增殖
• 凋亡

目的 探究MicroRNA-4516(miR-4516)、MicroRNA-198(miR-198)在视网膜母细胞瘤(RB)Y79细胞中的表达及其临床意义。方法 收集2018年3月至2021年3月行眼球摘除术治疗的35例RB患儿的肿瘤组织及30例正常视网膜组织标本，比较肿瘤组织、正常视网膜组织和Y79细胞中miR-4516、miR-198的表达水平。脂质体转染法建立miR-4516、miR-198过表达组(miR-4516-mimics组、miR-198-mimics组)、抑制组(miR-4516-inhibitor组、miR-198-inhibitor组)和对照组(miR-4516-NC组、miR-198-NC组)。CCK-8法检测转染24 h、48 h和72 h后各组细胞的增殖活性；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测转染48 h后各组细胞miR-4516、miR-198表达水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Western blot法检测各组细胞P53、Bcl-2蛋白表达。结果 肿瘤组织及Y79细胞中miR-4516的表达水平均高于正常视网膜组织，miR-198则相反，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。细胞转染48 h后，miR-4516、miR-198分别在各自的inhibitor组、NC组和mimics组细胞内相对表达量逐渐升高(均为P<0.05)。转染后24 h、48 h、72 h,各组细胞增殖活性均逐渐升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05),且同一时间点各组的细胞增殖活性比较，miR-4516-mimics组>miR-4516-NC组>miR-4516-inhibitor组，miR-198-inhibitor组>miR-198-NC组>miR-198-mimics组，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。转染后48 h,各组细胞凋亡率比较，miR-4516-inhibitor组>miR-4516-NC组>miR-4516-mimics组，miR-198-mimics组>miR-198-NC组>miR-198-inhibitor组，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。P53蛋白在miR-4516-mimics组、miR-4516-NC组和miR-4516-inhibitor组中表达逐渐升高，Bcl-2蛋白表达逐渐降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05);P53蛋白在miR-198-mimics组、miR-198-NC组、miR-198-inhibitor组中表达逐渐降低，Bcl-2蛋白表达逐渐升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 miR-4516在RB肿瘤组织及Y79细胞中呈高表达状态，miR-198呈低表达状态；miR-4516可促进Y79细胞增殖，抑制其凋亡，miR-198可抑制Y79细胞增殖，二者有望成为RB的新的肿瘤标志物。

• 单位
  郑州儿童医院; 郑州大学; 首都医科大学附属北京儿童医院