氧糖剥夺/恢复对A549肺泡上皮细胞焦亡的影响

作者：王小燕; 肖宗懿; 易寒; 安雨轩; 宋娟; 陈菲; 王寿勇^*

来源：中国细胞生物学学报, 2020, 42(11): 1969-1974.

DOI：10.11844/cjcb.2020.11.0007

• 氧糖剥夺
• 焦亡
• A549肺泡上皮细胞
• VX-765

通过建立A549肺泡上皮细胞氧糖剥夺/恢复(oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R)模型,模拟临床体外循环中肺泡上皮细胞缺血–再灌注过程,观察OGD/R是否引发A549细胞焦亡,为进一步探讨CPB相关肺损伤发生机制提供参考。采用RT-qPCR法和Western blot法检测焦亡相关基因Caspase1、ASC、NLRP3、GSDMD的mRNA转录和蛋白质表达水平,并进一步观察Caspase1特异性拮抗剂VX-765对Caspase1、焦亡效应蛋白GSDMD、培养上清液中Caspase1焦亡效应产物IL-1β、IL-18表达水平以及细胞存活率的影响。结果显示与对照组相比,OGD/R后A549细胞Caspase1活性增高(P<0.05),焦亡相关基因Caspase1、ASC、NLRP3、GSDMD的mRNA和蛋白质表达均上调(P<0.05);采用拮抗剂VX-765预处理后,细胞焦亡相关蛋白Caspase1、GSDMD表达量明显减少(P<0.05),细胞培养上清液中焦亡标志产物细胞因子IL-1β、IL-18水平显著下降(P<0.05),细胞存活率得到恢复。该研究表明,氧糖剥夺/恢复可诱导A549肺泡上皮细胞发生焦亡,抑制细胞焦亡的发生对氧糖剥夺/恢复细胞模型具有保护作用。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院