visfatin对体外脂肪细胞胰岛素受体底物和PI3K表达的影响

作者：潘宝龙; 巫玲; 潘丽; 马润玫

来源：吉林大学学报(医学版), 2017, 43(02): 225-229.

DOI：10.13481/j.1671-587x.20170203

• 糖尿病,2型
• 内脏脂肪素
• 胰岛素抵抗
• 胰岛素受体底物

目的:从胰岛素经典信号传导通路磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)角度探讨内脏脂肪素(visfatin)与2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:复苏、传代和诱导分化人源T2DM前脂肪细胞,构建visfatin过表达载体,进行载体转化、培养和提取;以4个不同表达梯度(0.0、1.0、2.5和5.0μg)转染传代脂肪细胞,以0.0μg组为对照组,其余3组为观察组;Q-PCR法检测visfatin、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)和PI3K(P85α)mRNA表达水平,Western blotting法检测visfatin、IRS-1、IRS-2和PI3K(P85α)蛋白表达水平及IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平,[3 H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法测定细胞葡萄糖摄取率的变化。结果:各组visfatin mRNA及蛋白表达水平随转染浓度梯度升高而升高(P<0.01),所构建visfatin过表达载体有效。随visfatin表达增加,各组IRS-1和PI3K(P85α)mRNA和蛋白表达水平以及IRS-1磷酸化程度均明显升高(P<0.01),但IRS-2mRNA和蛋白表达水平未出现明显变化(P>0.05)。脂肪细胞的葡萄糖摄取率随visfatin表达增加而升高(P<0.05)。结论:体外脂肪细胞visfatin过表达可增加IRS-1和PI3K的表达水平。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院; 昆明医科大学第六附属医院