天麻多糖经miR-27a-3p/B7-H3通路对砷暴露下结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响

作者：叶伟; 张曦^*

来源：职业与健康, 2023, 39(12): 1596-1603.

DOI：10.13329/j.cnki.zyyjk.2023.0344

• 天麻多糖
• 砷
• miR-27a-3p
• B7-H3
• 结肠癌

目的 探讨天麻多糖经微小核糖核酸-27a-3p(microRNA-27a-3p,miR-27a-3p)/B7同源物3(b7 homolog 3,B7-H3)通路对砷暴露下结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法 结肠癌细胞分为SW480细胞组、砷(arsenic,As)暴露组(500μg/mL As2O3处理)、低剂量天麻多糖组(500μg/mL As2O3以及500μmol/mL天麻多糖处理)、高剂量天麻多糖组(500μg/mL As2O3以及1 000μmol/mL天麻多糖处理)，以上各组细胞设6个复孔，培养时间为72 h。试验结束后，3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT)法测定各组癌细胞增殖情况；细胞迁移实验(transwell,transwell)法、伤口愈合试验测定各组癌细胞侵袭迁移情况；流式细胞仪测定各组癌细胞凋亡水平；逆转录定量聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法及蛋白印迹法测定各组癌细胞miR-27a-3p、B7-H3水平。结果 与SW480细胞组比较，As暴露组OD值(0.66±0.03 vs 0.95±0.04)、存活率水平[(60.01±5.50)%vs(89.74±6.07)%]、单克隆形成数目[(126.69±39.65)个vs(1 985.36±398.52)个]、穿膜数[(256.68±86.21)个vs(2 472.57±186.52)个]、迁移距离[(256.68±86.21)μm vs(2 472.57±196.52)μm]、B7-H3 mRNA蛋白表达水平(0.64±0.27 vs 2.89±0.23、0.23±0.28 vs 1.27±0.23)显著升高，凋亡率[(20.30±5.89)%vs(3.40±0.97)%]、miR-27a-3p mRNA表达水平(3.39±0.41 vs 0.66±0.43)显著降低(均P<0.01)。与As暴露组比较，低高剂量天麻多糖组OD值(0.95±0.04 vs0.84±0.03、0.76±0.03)、存活率水平[(89.74±3.07)%vs(81.03±3.04)(63.56±5.05)%]、单克隆形成数目[(1 985.36±398.52)个vs(1 025.63±325.66)(562.96±105.59)个]、穿膜数[(2 472.57±186.52)个vs(1 842.36±165.52)(635.20±189.36)个]、迁移距离[(259.96±15.32)μm vs(1 85.22±9.88)(98.99±8.25)μm]、B7-H3 mRNA蛋白表达水平(2.89±0.23 vs 2.01±0.26、1.53±0.24,1.27±0.23 vs 0.89±0.25、0.53±0.24)显著降低，凋亡率[(3.40±0.97)%vs(12.30±1.58)%、(17.70±0.98)%]、miR-27a-3p m RNA表达水平(0.66±0.43 vs 1.73±0.36、2.65±0.39)显著升高；且高剂量天麻多糖组OD值、存活率水平、单克隆形成数目、穿膜数、迁移距离、B7-H3 mRNA蛋白表达水平明显低于低剂量天麻多糖组，凋亡率、miR-27a-3p m RNA表达水平明显高于低剂量天麻多糖组(均P<0.05)。结论 天麻多糖能抑制砷暴露下结肠癌细胞增殖、侵袭，促进其凋亡；其机制可能与天麻多糖促进miR-27a-3p表达进而抑制了B7-H3的表达有关。