巨噬细胞分泌TNF-α调控CLDN10通路促进膀胱癌细胞上皮-间质转化

作者：韩娜^*; 陈函; 张海燕

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(16): 1741-1747.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202301051

• 巨噬细胞
• CLDN10
• TNF-α
• 膀胱癌

目的 探讨巨噬细胞调控膀胱癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)发生的作用机制。方法 收集2000-2015年在重庆大学附属肿瘤医院泌尿肿瘤科行根治性膀胱切除术的137例患者膀胱癌(bladder cancer, BC)组织切片，采用免疫组化(immunohistochemical, IHC)实验检测其CLDN10(claudin10)的表达，分析CLDN10的表达与患者临床资料的相关性。SiRNA干扰技术敲低RAW264.7细胞的TNF-α后，将鼠源膀胱癌细胞MB49与鼠源巨噬细胞RAW264.9共培养，运用Western blot实验检测MB49细胞内EMT相关蛋白的表达变化。采用免疫荧光实验检测MB49细胞内CLDN10与β-catenin蛋白的结合变化。用平板克隆形成实验检测MB49细胞与RAW264.7细胞内EMT相关蛋白的表达变化。结果 在137例标本中，CLDN10高表达68例，CLDN10高表达与肿瘤分期(P=0.014)、淋巴结转移(P=0.005)呈正相关，与生存时间(P=0.048)、无复发生存时间(P=0.008)呈负相关。外源性TNF-α作用膀胱癌细胞后，免疫荧光结果显示CLDN10在膀胱癌细胞的表达增加，Western blot结果显示EMT相关蛋白Vimentin、Snail、Twist的表达上调(P<0.05);抑制巨噬细胞TNF-α后与膀胱癌细胞共培养，发现膀胱癌细胞内Vimentin、Snail、Twist的表达下调(P<0.05)。将RAW264.7细胞与MB49细胞共同培养后，MB49细胞内Vimentin、Snail、Twist的表达上调，E-cadherin表达下调(P<0.05)。结论 巨噬细胞通过分泌TNF-α调控CLDN10/β-catenin信号通路促进膀胱癌细胞的增殖和EMT发生。

• 单位
  重庆市肿瘤研究所