猴免疫缺陷病毒荧光定量聚合酶链反应检测标准品的体外合成

作者：何金洋; 符林春; 陈媛; 邓文娣; 周映云; 周利平

来源：广州中医药大学学报, 2007, (04): 351-354.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2007.04.026

• 猴获得性免疫缺陷综合征
• RNA病毒
• 逆转录聚合酶链反应 SIMIAN ACQUIRED IMMUNODEFICIENCY SYNDROME
• RNA VIRUS
• REVERSE TRANSCRIPTION POLYMERASE CHAIN REACTION

【目的】合成猴免疫缺陷病毒(SIV)荧光定量检测标准品,并总结出核糖核酸(RNA)标准品体外合成的基本原则。【方法】首先寻找到SIV保守序列,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆于T载体,测序,然后在所测得的SIV序列中进一步寻找保守序列,设计带有T7启动子的引物,PCR扩增,将所获得的PCR产物凝胶回收纯化,用T7RNA聚合酶进行体外合成RNA,再用PCR和电泳检测验证。【结果】通过数次引物调整,最终成功合成了SIV荧光定量PCR标准品。【结论】SIV荧光定量标准品的成功合成必须遵守以下4条基本原则:①必须选择保守序列;②在选择保守序列之后还需要搜索是否含有较多潜在的终止密码或者...

• 单位
  广州中医药大学热带医学研究所; 广州中医药大学