抗脂肪细胞40 000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体的构建

作者：高士争; 尹革芬; 张玉静; 汪磊; 张曦

来源：中国兽医学报, 2007, 27(3): 376-381,386.

DOI：10.3969/j.issn.1005-4545.2007.03.024

• 脂肪细胞
• 单链抗体
• 毕赤酵母
• 表达载体

采用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞克隆IgG1 Fc片段基因,经序列分析表明,该Fc片段基因长699 bp,具有完整的铰链区、CH2和CH3结构区,与GenBank中人IgG1重链Fc片段基因序列完全相同.将Fc片段基因与pPICZαA酵母载体连接先构建pPIgG1质粒,然后将抗脂肪细胞40 000特异膜蛋白的噬菌体scFv抗体基因插入到pPIgG1质粒,构建pPIgG1-scFv酵母表达载体.序列分析表明,scFv基因与Fc片段基因拼接正确,阅读框正确无误,表明成功构建了抗脂肪细胞40 000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体.本试验为下一步在毕赤酵母中大量表达与IgG结构相似、具有较高亲和力和生物活性的scFv-Fc融合抗体分子奠定了基础.

• 单位
  华东师范大学; 动物科技学院; 云南农业大学; 吉林大学