m~6A去甲基化酶ALKBH5抑制胃癌细胞运动侵袭和Wnt信号通路活性的机制

作者：沈李婷; 李金洋; 李先峰; 车林茸; 刘科伟; 刘琴; 王斌; 覃中毅; 陈东风

来源：第三军医大学学报, 2021, 43(06): 459-466.

DOI：10.16016/j.1000-5404.202011217

• ALKBH5
• RNA甲基化
• Wnt信号通路
• 胃癌侵袭

目的研究RNA去甲基化酶ALKBH5对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。方法利用人类癌症基因库(the cancer genome Atlas, TCGA)对ALKBH5差异表达的胃癌患者进行总生存期分析;应用小鼠胃原位种植和转移模型分析ALKBH5的蛋白表达与胃癌细胞转移的相关性;通过构建敲低/过表达细胞株,结合Transwell实验研究ALKBH5对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响;利用m~6A修饰位点预测网站m~6AVAR(http://m~6Avar.renlab.org/index.html),结合蛋白免疫印迹、放线菌素D处理结合实时荧光定量PCR,检测Wnt信号通路下游基因表达和mRNA稳定性。结果 TCGA数据库提示ALKBH5的低表达提示胃癌患者更短的生存期;体内实验验证ALKBH5的低表达与胃癌细胞远处转移相关;ALKBH5的敲低可以促进胃癌细胞的侵袭和转移;Wnt下游分子MYC,CD44,c-Met的mRNA上存在m~6A修饰位点;ALKBH5缺失时,Wnt下游分子的蛋白表达增加及mRNA稳定性增强。结论 ALKBH5表达缺失促进胃癌细胞迁移和侵袭能力,维持Wnt信号通路的激活。

• 单位
  第三军医大学; 大坪医院; 中国人民解放军陆军军医大学