人肿瘤坏死因子α特异性结合miR-146b的新生物学特性研究

作者：沈雪莲; 李洁; 黄皑雪; 王超男; 孙乐桥; 李少华; 丁红梅; 李慧; 郭晓华; 郑伟; 董洁; 邵宁生

来源：生物技术通讯, 2016, 27(02): 183-187.

• 人肿瘤坏死因子α
• microRNA
• RNA结合蛋白
• RNA结合蛋白免疫共沉淀

目的:探讨人肿瘤坏死因子α(TNF-α)作为micro RNA(mi RNA)结合蛋白的生物学特性。方法:Western印迹检测LPS激活的U937细胞中TNF-α蛋白表达水平,RT-PCR检测几种炎症相关的mi RNA在激活前后表达水平的变化;用RNA结合蛋白免疫共沉淀(RIP)技术钓取U937细胞中TNF-α结合的mi RNA,RT-PCR检测RIP产物中上述几种mi RNA的含量;用凝胶阻滞实验检测TNF-α与mi RNA是否直接结合。结果:LPS激活的U937细胞中能检测到膜结合型和可溶性2种形式的TNF-α,细胞激活前后mi R-16和mi R-21的表达水平在检测的几种mi RNA中最高,mi R-146b和mi R155次之;而RIP产物中mi R-146b的水平在实验组和对照组中有显著差异,其他mi RNA差异不明显;凝胶阻滞实验结果显示mi R-146b能与人TNF-α直接结合。结论:首次证实人TNF-α能够直接特异地结合mi R-146b,提示TNF-α可能作为mi RNA结合蛋白发挥生物学功能。

• 单位
  广西医科大学; 军事医学科学院基础医学研究所