微小RNA-30a靶向调控Snail影响胃癌SGC7901细胞迁移和侵袭能力

作者：樊瑞智; 李海青; 曹允友; 徐溢新; 宋虎; 白津; 徐为; 郑骏年; 宋军

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(11): 1919-1921.

• 胃癌
• 微小RNA-30a
• Snail
• 上皮-间充质转化

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-30a影响胃癌细胞迁移和侵袭能力的分子机制。方法将Snail 3’端非编码区(3’-UTR)野生型及突变型载体与miR-30a模拟物或miR-30a阴性对照共转染胃癌SGC7901细胞,双荧光素酶报告基因验证Snail是否为miR-30a下游的靶基因。实验分miR-30a组(转染miR-30a mimics)、miR-30a-Snail组(转染miR-30a mimics及Snail过表达质粒)、空白对照组(转染空白质粒NC)3组;Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测各组细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、纤维粘连蛋白(Fibronectin)、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达水平。结果双荧光素酶实验结果显示,共转染miR-30a和Snail基因3’-UTR质粒后,细胞中荧光素酶活性明显降低,miR-30a能与Snail的3’-UTR结合,并抑制其表达。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,miR-30a组穿过细胞数分别为[(100.0±5.8)、(56.8±3.7)],较空白对照组[(197.3±11.6)、(151.3±10.6)个]、miR-30a-Snail组[(183.0±7.4)、(163.0±7.4)个]明显降低,差异有统计学意义(P=0.002、0.000)。Western blot实验结果显示,E-cadherin蛋白水平,miR-30a组(38 954±173)较空白对照组(3 416±20)及miR-30a-Snail组(4 097±27)明显上升,差异有统计学意义(P=0.000),两对照组间差异无统计学意义(P=0.704);Fibronectin、Vimentin、N-cadherin蛋白水平,miR-30a组(8793±314、5473±97、5 911±144)较空白对照组(19273±324、11046±117、13116±239)及miR-30a-Snail组(17463±290、12781±177、14103±210)明显降低,差异有统计学意义(P=0.004),两对照组间差异无统计学意义(P=0.530)。结论 miR-30a可能通过靶向调控Snail影响胃癌EMT进程,进而影响胃癌细胞的迁移和侵袭能力。

• 单位
  徐州医科大学