二氢杨梅素的体外护肝作用：基于脂噬介导的LO2细胞脂质蓄积及HepG2细胞增殖

作者：廖晓珊; 郝宇婷; 伍梦婷; 刘会平; 蒋亮; 叶子充; 廖文镇; 邓红

来源：南方医科大学学报, 2022, 42(04): 518-527.

• 二氢杨梅素
• 非酒精性脂肪性肝病
• 脂噬
• AMPK/mTOR
• 增殖抑制

目的 基于脂噬途径研究二氢杨梅素（DMY）对LO2细胞脂质蓄积的防治效果及其机制，并探索其对HepG2细胞的增殖抑制。方法 FBS诱导LO2细胞建立脂肪变性模型，研究分别设置对照组：10%FBS-DMEM正常培养；模型组：50%FBS-DMEM；阳性对照组：100μg/mL DMY+10%FBS-DMEM；处理组（L-DMY组：50μg/mL DMY+50%FBS-DMEM;M-DMY组：100μg/mL DMY+50%FBS-DMEM;H-DMY组：200μg/mL DMY+50%FBS-DMEM）及恢复对照组：先50%FBS-DMEM培养，后10%FBS-DMEM培养。油红O染色测定脂滴累积。试剂盒测定TC、TG、LDL水平和AST、ALT和LDH酶活性。AO染色观察自噬溶酶体数量，透射电镜观察自噬体数量。Western blot检测自噬蛋白LC3表达量。MDC染色观察自噬体形成情况，q-PCR测定LC3、ATG7、AMPK、mTOR、p62和Beclin1的mRNA表达水平。细胞周期阻滞实验分析HepG2细胞周期比例，流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况，细胞DNA断裂实验检测HepG2细胞DNA的完整情况。结果 DMY干预和预处理可抑制LO2细胞的脂质蓄积，并且降低TC、TG、LDL水平和AST、ALT和LDH酶活性，差异具有统计学意义（P<0.05）;DMY可促进LO2细胞的自噬体和自噬溶酶体的形成，并促进自噬蛋白LC3的表达；DMY可减轻高FBS诱导的LO2细胞自噬体形成抑制，并上调LC3(P<0.01)、ATG7(P<0.01)、Beclin1(P<0.05)和AMPK(P<0.001)的mRNA水平，下调p62(P<0.001)和mTOR(P<0.001)的mRNA水平。DMY可阻滞HepG2细胞的有丝分裂和细胞增殖（53.90%vs 14.62%; 32.31%vs 70.17%），诱导HepG2细胞的晚期凋亡（4.74%vs 57.86%）和DNA断裂。结论 DMY通过调节AMPK/mTOR介导的脂噬途径减少LO2细胞的脂质累积，通过阻滞细胞周期和促进凋亡抑制HepG2增殖，发挥体外护肝作用。

• 单位
  南方医科大学; 公共卫生学院