摘要
采用草苁蓉多糖(Boschniakia rossica polysaccharides, BRP)对HL-7702细胞进行预保护,再用H2O2处理HL-7702细胞构建肝细胞氧化损伤模型。CCK-8法测定HL-7702细胞存活率,微板法测定HL-7702细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性,硫代巴比妥酸法检测HL-7702细胞丙二醛(malondialdehyde, MDA)的生成,Hoechst33342染色法及原位末端标记法观察HL-7702细胞的凋亡情况,蛋白印迹技术检测HL-7702细胞Caspase 3活性片段(C-casp3)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶活性片段[cleaved poly(ADP-ribose) polymerase, C-PARP]、细胞色素c(cytochrome c, Cyto c)、p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)、Bcl-2同源拮抗剂/杀伤剂(Bcl-2 homologous antagonist/killer, Bak)蛋白表达以及丝裂原活化蛋白激酶、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)激活情况。结果表明,300μmol/LH2O2处理HL-7702细胞6 h可使细胞存活率降低58%(P2O2能够诱导HL-7702细胞损伤。而50和100 mg/L BRP能够减缓H2O2导致的HL-7702细胞损伤。与模型组比较,BRP高剂量组HL-7702细胞存活率增高30.8%(P2O2诱导的HL-7702细胞损伤,并抑制HL-7702细胞凋亡,此作用可能与BRP对ERK、JNK、NF-κB通路的调控有关。
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单位延边大学; 延边大学附属医院