摘要
为筛选山药不同生长期叶片及不同器官能稳定表达的内参基因,运用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)技术结合4个内参基因稳定性分析软件(geNorm, NormFinder, Delta CT和RefFind),以山药不同生长期叶片为试验材料,分析了CKI、YLS8、eIF1-3、ELF、TRX-1、eIF1-2、60S、40s-2、HIS、α-TUB、CHC、bHLH、TRX-2、eIF1-1、F-box、40s-1、26S和ACT等18个基因在生长期叶片里的稳定性;以不同器官(茎尖, 叶片, 根尖, 块茎, 珠芽, 雄花)为试验材料,分析了CKI-2、F-box-2、MYB、ACT-1、EFI、bHLH13、CKI-1、eIF1、ACT-2、CHC1-1、CHC1-2和F-box-1等12个基因在不同器官里的稳定性。结果表明:Delta CT分析和综合分析都认为F-box基因在不同生长期叶片中表达稳定性最高,是最佳的不同生长期叶片内参基因。geNorm、NormFinder和Delta CT三个分析软件及RefFind在线软件综合分析都认为CKI-2基因在不同器官中表达最稳定,是最佳的不同器官内参基因。本研究筛选出山药叶片不同生长期及不同器官的荧光定量PCR内参基因,为后期开展山药相关基因荧光定量表达分析提供了内参基因。
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单位云南农业大学; 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所