脑脂结合蛋白在胶质母细胞瘤U251细胞自噬中的调节作用

作者：张惠雯; 张俊荣; 施金洪^*

来源：南通大学学报(医学版), 2023, 43(03): 207-210.

DOI：10.16424/j.cnki.cn32-1807/r.2023.03.002

• 胶质母细胞瘤
• 脑脂结合蛋白
• U251细胞
• 自噬

目的 ：探讨脑脂结合蛋白(brain lipid binding protein, BLBP)在胶质母细胞瘤U251细胞自噬中的调节作用。方法：应用CRISPR/Cas9技术敲除U251细胞中BLBP的表达，检测BLBP敲除后U251细胞的活力变化；Ad-GFPLC3b腺病毒感染U251细胞后，检测细胞中GFP-LC3b绿色荧光颗粒的数目；Western Blot检测自噬相关分子微管相关蛋白1轻链3βⅠ/Ⅱ(microtubule associated protein 1 light chain 3 betaⅠ/Ⅱ, LC3bⅠ/Ⅱ)、自噬相关基因5(autophagy-related genes 5, ATG5)、选择性自噬接头蛋白(sequestosome1, SQSTM1)的蛋白表达水平；Real-time PCR检测ATG5、SQSTM1的基因表达变化。结果：BLBP基因敲除后，U251细胞的活力明显下调，GFP-LC3b绿色荧光颗粒数目较对照组明显增多；此外，LC3bⅡ的蛋白表达水平较对照组明显增高，SQSTM1蛋白水平明显下降，而ATG5的基因和蛋白表达水平均明显上调。结论：BLBP基因敲除能提高U251细胞的自噬水平，BLBP具有调节胶质母细胞瘤细胞自噬的能力。

• 单位
  南通大学; 南通大学附属医院